96 孔板 · 2 倍梯度 · CLSI 口径

MIC 微量稀释板

MIC(最低抑菌浓度)测定板:药物在板上按 2 倍逐级稀释,培养后看哪一孔细菌停止生长,那一孔的浓度就是 MIC。填好参数配板,培养后把各孔生长情况点进板面,自动算出每行 MIC 并给出敏感 / 中介 / 耐药提示。

① 填参数→② 按方案配板,35–37 ℃ 培养 16–20 h →③ 培养后点孔标记各孔浑浊情况 →④ 看结果、复制导出 | 首次使用?点下方「载入示例」看完整效果

① 板面配置

常规药敏一律用 2 倍稀释,一般不用改

每行末尾自动附 2 个对照孔:GC 生长对照(无药 + 菌,必须生长)、ST 无菌对照(仅培养基,必须不长)

µL

标准微量稀释板为 100 µL,一般不用改

各行配置(名称 / 起始浓度 µg/mL)

起始浓度 = 梯度第 1 孔(最高浓度)。建议覆盖预期 MIC 的 2–8 倍之上;不确定时参考该药常规治疗浓度或先做预实验。

② 96 孔板模拟

培养结束后逐孔观察:澄清(无生长)还是浑浊(有生长)?单击孔切换:+有生长 → −无生长 → 清除。已判读的孔着色,MIC 孔自动描边。

有生长(浑浊 +) 无生长(澄清 −) 对照孔 MIC 所在孔

③ 判读结果

S ≤ R ≥ µg/mL

MIC ≤ 敏感上限 → 敏感(S);≥ 耐药下限 → 耐药(R);之间 → 中介(I)。不同药物折点不同,请查最新 CLSI M100 / EUCAST 折点表。

详细操作流程(板内稀释法)与判定依据

板内稀释法流程(每孔终体积 100 µL:2× 药液 50 µL + 2× 菌悬液 50 µL): ① 第 1 孔加 2× 最高浓度药液 50 µL;② 第 2–10 孔预加 MHB 肉汤 50 µL; ③ 第 1 孔混匀后取 50 µL 转移至第 2 孔,逐孔倍比稀释,第 10 孔混匀后弃 50 µL; ④ 全部试验孔与 GC 孔各加 2× 菌悬液 50 µL(终浓度约 5×10⁵ CFU/mL,取 0.5 麦氏比浊管 菌液稀释 150 倍); ⑤ ST 孔仅加 MHB 100 µL;⑥ 35–37 ℃ 培养 16–20 h 后判读。

MIC 判定:肉眼观察(或 OD₆₀₀ ≥ 0.1 视为生长),无可见生长的最低药物浓度即为 MIC。 GC 孔必须有生长、ST 孔必须无生长,否则实验无效。

S / I / R 判定:MIC 与 CLSI M100 或 EUCAST 公布的临床折点比较:MIC ≤ 敏感折点报敏感(S,常规剂量有效);≥ 耐药折点报耐药(R,常规剂量无效);之间报中介(I,加大剂量或药物浓缩部位可能有效)。折点因药物和菌种而异,务必查最新版本。

质控提示:每批实验建议同步质控菌株(如大肠埃希菌 ATCC 25922、金葡菌 ATCC 29213), MIC 应落在 CLSI M100 质控范围内;跳孔生长常为污染,非单调模式请复核。

本工具仅供科研参考,不构成临床诊疗依据;药敏报告请遵循 CLSI M100 / EUCAST 最新折点表。